分享G418在体外破坏mRNA的稳定性

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mRNA稳定性是蛋白质表达的关键决定因素，对单个mRNA的特异性较低，翻译也会促进mRNA衰变。原核和真核翻译抑制剂都广泛稳定mRNA，破坏tRNA生物发生的突变同样稳定酵母中的mRNA。这些发现表明翻译是mRNA稳定性的关键决定因素。做这些简单的事情，也可以让冷冻电镜播种下优质的基因，最终长成参天大树，成为行业的翘楚。在北京，杭州等地都配备了最先进的冷冻电镜，特别是利用X射线晶体学难以解析的膜蛋白等蛋白质。https://www.shuimubio.com

科学家们提出核糖体错误是否会影响哺乳动物系统中的mRNA稳定性。在验中，科学家们测试了Geneticin-G418，这是一种氨基糖苷类抗生素?,在分子遗传试验中，它通过抑制转座子Tn601，Tn5的基因,干扰核糖体功能而阻断蛋白质合成，对原核和真核等细胞产生素，是稳定转染比较常用的抗性筛选试剂看其是否影响mRNA稳定性，美迪西生物医药可对此类药物进行药效评价。

在验过程中，科学家们首先滴定了兔织红细胞裂解物中的翻译抑制剂，并量化了报告基因mRNA，确定了所有种翻译抑制剂的浓度，其中荧光素酶产生一致，但适度降低。使用这些中间抑制剂浓度，在翻译反应期间定量了萤火虫荧光素酶mRNA水平。



上图为验数据，在中间抗生素浓度（50ngμLG418和嘌呤霉素，25ngμL环己酰亚胺）下，G418相对于对照反应和与其他翻译伸长抑制剂的反应不稳定。30分钟后，与对照反应相比，含有G418的体外翻译反应具有显着较少的mRNA，并且与没有抑制剂的对照反应相比，环己酰亚胺和嘌呤霉素都相对稳定，含有G418的翻译反应结束时存在的mRNA明显较少。总而言之，这些数据表明G418会破坏mRNA的稳定性。

参考文献：

[1]RSGupta,DSchlessingerCouplingofratesoftranscription,translation,andmessengerribonucleicaciddegradationinstreptomycin-dependentmutantsofEscherichiacoliJBacteriol1976Jan;125(1):84-93doi:101128jb1284-931976

[2]YavuzTDurmaz,etalGeneticinreducesmRNAstabilityPLoSOne2022;17(7):e0272058Publishedonline2022Jul28doi:101371journalpone0272058